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技術文章
DNase I 牛胰腺脫氧核糖核酸酶I (懋康生物整理)

Deoxyribonuclease I (DNase I) 脫氧核糖核酸酶I,來源于牛胰腺

(凍干粉形式,即用型液體形式,懋康生物)

 

關鍵詞:

脫氧核糖核酸酶I DNase I;核糖核酸酶 RNase;核酸酶 Benzonase;Sigma D5025; Sigma DN25;CAS:9003-98-9;

 

基本介紹:

脫氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,縮寫DNase I,在大多數細胞和組織中都能發現的一種核酸內切酶,偏好切割鄰近嘧啶的磷酸二酯鍵,產生5’端為磷酸基團、3’端為羥基的多聚核苷酸(見下圖反應流程圖),平均消化產物zui小為多聚四核苷酸。Mg2+存在條件下,DNase I可隨機識別和切斷DNA任一條鏈上的任意位點;而在Mn2+存在條件下,DNase I識別DNA的兩條鏈并在幾乎相同的位點進行切割。DNase I可水解多種形式DNA,如單鏈DNA、雙鏈DNA,甚至染色質(其切割速率受組蛋白影響)。

脫氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,縮寫DNase I,zui早從胰腺中分離而來,至今哺乳動物胰腺也是zui主要的來源之一。DNase I以兩對二硫鍵結合的多種糖蛋白混合形式存在。zui加的工作范圍是pH 7-8,DNase的活性依賴于Ca2+,并可被二價金屬離子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5mM Ca2+可保護酶使其不被水解,而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原來的1/2。

 

主要應用:

◇   制備不含DNA的RNA樣本;

◇   RT-PCR反應前RNA樣本內基因組DNA等可能存在DNA污染的去除;

◇   T7,T3,SP6等RNA聚合酶催化的體外RNA轉錄后DNA模板的去除;

◇   DNase I足跡法(DNase I footprinting)研究DNA-蛋白質相互作用;

◇   缺口平移法標記探針用;

◇   制備隨機DNA片段文庫;

◇   TUNEL細胞凋亡檢測中用于剪切DNA制備陽性對照;

 

我司(懋康生物MKBio)提供的脫氧核糖核酸酶I(DNase I),來源于牛胰腺,通過親和色譜純化所得,不含RNase和蛋白酶污染。為了滿足工業用戶和科研用戶的不同應用需求,我們提供凍干粉(不同比活)和即用型液體形式的DNase I。具體信息如下:

 

一、脫氧核糖核酸酶I(DNase I)(凍干粉形式,比活力≥2000 Kunit U/mg protein)

1.1 產品特征:

1)   CAS NO:9003-98-9

2)   蛋白純度:≥80%(biuret),色譜純化

3)   比活力:≥2000Kunit Units/mg protein

4)   活力定義:25℃,pH5.0條件下DNase催化底物DNA,使每毫升每分鐘ΔA260增加0.001的變化定義為一個酶活力單位(Kunitz unit)。

5)   激活劑:多種二價金屬離子如Mg2+、Mn2+、 Ca2+、Co2+、and Zn2+

6)   抑制劑:β-巰基乙醇;螯合劑;SDS;肌動蛋白;并沒有特異性抑制DNase I酶活的通用抑制劑,比如檸檬酸鹽抑制Mg2+活化的DNase I,但不能影響Mn2+激活的DNase I。

7)   溶解性:溶于0.15M NaCl(5mg/ml),無色透明溶液

 

1.2 訂購信息:產品性能媲美Sigma D5025,本品生產至少十年以上,銷售到國內各大實驗室,歡迎各大工業和科研用戶前來咨詢。

產品名稱

產品編號

規格         

價格          

Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥2,000 units/mg protein

脫氧核糖核酸酶I,來源于牛胰腺

MF0401-15KU   

15KU

380

MF0401-50KU

50KU

980

 

二、脫氧核糖核酸酶I(DNase I)(凍干粉形式,比活力≥500 Kunit U/mg protein)

2.1 產品特征:

8)   CAS NO:9003-98-9

9)   分子量:~31 kDa

10)同義名:DNase I, Deoxyribonucleate 5’-oligonucleotidohydrolase, Deoxyribonuclease A 脫氧核糖核酸 5′-寡核苷酸水解酶,脫氧核糖核酸酶A

11)  比活力:≥500 Kunit Units/mg protein

12)  活力定義:在50µl含40mM Tris-HCl, pH8.0,2.5 mM MgSO4,1mM CaCl2的反應緩沖體系中,37℃,10min內*降解1µg λ-DNA所需的酶量即為一個活力單位。此反應條件下得到的一個單位DNase活力約等于一個Kuntiz unit。

 

2.2 訂購信息:產品性能媲美Sigma DN25。比活低于MF0401(≥2,000 Kunit U/mg protein),價格更加經濟。

產品名稱

產品編號

規格 

價格        

Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein  

脫氧核糖核酸酶I,來源于牛胰腺

MF0402-10MG   

10MG     

250

MF0402-50MG

50MG

680

 

三、脫氧核糖核酸酶I(DNase I)(即用型溶液)

該試劑盒形式提供,其中DNase I以即用型溶液(1U/μl) 形式提供,酶經過嚴格質控能*的消化模板;還提供10× Reaction Buffer和10× Stop Solution,節省了試劑配制的時間,用起來更加快捷。

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

 

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