西西人体大胆午夜视频-内射白浆一区二区在线观看-午夜影视啪啪免费体验区-亚洲精品一区二区三区福利-无码超级大爆乳在线播放

歡迎光臨上海懋康生物科技有限公司
主頁 > 新聞動態 > 你知道我們為什么需要酵母感受態細胞么
新聞動態
你知道我們為什么需要酵母感受態細胞么
  酵母,如釀酒酵母、裂殖酵母和畢赤酵母,通常用于生物學實驗研究。酵母是易于培養的單細胞真核生物,他們的基因和蛋白質與哺乳動物具有很好的相似性,所以是生物模型。
 
  酵母細胞用于研究基因功能,蛋白質相互作用,細胞通路等,也是大規模異源蛋白表達和小分子生產的宿主,在發酵,釀造和制藥行業等起著*的作用。涉及酵母的常見的實驗有酵母雙/三雜交系統,突變體篩選庫和同源重組,等等。
 
  為什么我們需要酵母感受態細胞?
 
  通常,在實驗過程中需外源DNA引入到酵母細胞。引入基因片段(線性ssDNA或質粒)是通過酵母細胞的轉化來實現的,具體方法有化學法,如醋酸鋰和聚乙二醇(PEG)或電穿孔法。
 
  有效的酵母轉化需要高質量的酵母感受態細胞為開始。勝任力則是指細胞能吸收游離的細胞外的遺傳物質(如質粒DNA)的能力。
 
  二、酵母感受態細胞的制備
 
  獲得感受態細胞相當簡單,但許多研究人員在實現良好的生存比例和轉換效率時 遇到問題。常見的誤區包括由于制備條件惡劣導致高的細胞死亡率,或由于無效的感受態細胞制備導致轉化效率低。
 
  雖然酵母細胞和大腸桿菌一樣容易生長和轉化,但它們需要不同的處理方法來制備感受態細胞和轉化。酵母細胞像哺乳動物細胞一樣,有類似的處理程序。典型的酵母感受態細胞制備協議如下:
 
  過夜培養你想轉化的酵母菌菌株,使用營養豐富的培養基培養不含質粒的細胞。對于已經含有質粒的細胞,使用適當的選擇性培養基來維持質粒。
 
  當細胞密度達到1 - 2 x 107cells/mL,離心收獲細胞。細胞密度可以通過使用分光光度計在OD600檢測,或者使用血球計在顯微鏡下計數細胞。
 
  沖洗細胞,重懸于無菌水,離心,棄上清,重復此步驟兩次以*清洗細胞。
 
  一次洗完,將細胞重懸于感受態細胞溶液,分裝,大約每管108個細胞,每個轉化反應將使用這些數量的細胞。分裝好的管子放于-80°C,供以后實驗使用。
 
  在所有步驟中,使用質量好的無菌過濾器消毒過的試劑,以防止污染問題。
 
  感受態細胞溶液包含濃度的冷凍保護劑,這些濃度應該在你的實驗室標準化,根據使用的酵母菌株和細胞的濃度。標準協議使用5%的甘油 + 10% DMSO溶液混合,這種配方被廣泛應用來制備感受它細胞,也可根據具體情況進行輕微的改變或調整。
  • © 2019 上海懋康生物科技有限公司 版權所有 技術支持:環保在線
  • 電 話:18616957973 傳 真:86-021-54736159 QQ號碼:1563822900 郵 箱:2971634497@qq.com 地 址:上海市閔行區虹梅南路2588號綠亮科創園1幢A棟321室
  • 備案號:滬ICP備16016464號-3 總訪問量:614376
在線客服 聯系方式

服務熱線

18616957973

主站蜘蛛池模板: 久久777国产线看观看精品| 麻豆视传媒官网免费观看| 亚洲xxxx做受欧美| 东京热毛片无码dvd一二三区| 亚洲另类欧美综合久久图片区| 国产精品久人妻精品老妇| 精品一区二区三区国产在线观看| 无码人妻av免费一区二区三区| 人人摸人人搞人人透| 蜜柚av久久久久久久| 国产高清吹潮免费视频| 波多野42部无码喷潮| 国产自产妇一区二区三区| 国产久9一区二区在线视频| 中文字幕av日韩精品一区| 婷婷开心深爱五月天播播| 人与动人物xxxx毛片| 色综合99久久久无码国产精品 | 天天做天天爱夜夜爽导航| 色欲综合视频天天天综合网站| 日本高清www午色夜在线视频| 欧美a级一区二区三区视频观看| 国产人在线亚洲一区二区三区| 免费看小12萝裸体视频国产| 99在线精品国自产拍不卡| 国产农村黄aaaaa特黄av毛片| 无遮挡边吃摸边吃奶边做| 揉捏奶头高潮呻吟视频| 国产成人精品av| 精品福利一区二区三区免费视频 | 99无码人妻一区二区三区免费| 国产精品亚洲a∨天堂不卡| 无码一区二区三区在线| 国产午夜福利精品久久2021| 大桥久未无码吹潮在线观看| 色综合天天综合高清网国产在线| 韩国美女一区二区| 国产精品日韩欧美一区二区区| 日日摸日日碰夜夜爽av| 亚洲精品精华液一区| 国产手机精品一区二区|